干貨！疫苗注射后效果評價(jià)
發(fā)布于：2021-02-01
文章來源：[中文]九強(qiáng)生物
文章作者?/?龔俊
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來自九強(qiáng)研發(fā)工程師的溫馨小提示：急性子可以直接閱讀下方總結(jié)
疫苗是我們目前應(yīng)對新冠疫情最重要的武器。注射新冠疫苗后，可以通過競爭法檢測中和抗體的水平，在一定程度上表征疫苗是否能產(chǎn)生效果。中和抗體能維持多久、多高滴度的中和抗體才能產(chǎn)生保護(hù)效果等疑問還有待確定。但是無論有效與否，無論中和抗體能維持多久，疫苗的目的是減少被感染的幾率，為了“防患于未然”，日常還是需要加強(qiáng)戴口罩、勤洗手、保持社交距離等防疫措施。
對于疫苗效果的評價(jià)，目前最直接的方法是將注射過疫苗的人群和注射過安慰劑的人群（是否接種了疫苗只有實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)者知道，操作人員和志愿者都不知道）都暴露于相同的環(huán)境，然后比較兩組人群的感染率。如果疫苗組的感染率遠(yuǎn)低于安慰劑組，且統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果有差異，那么疫苗就是有保護(hù)效果的。美國輝瑞、中國國藥的3期臨床實(shí)驗(yàn)大致就是這個(gè)方案，且都顯示了非常明顯的保護(hù)效果，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于世界衛(wèi)生組織最初設(shè)定的50%的保護(hù)率。
除上述這種最直接的方法，有沒有其它方法來測量或者表征疫苗的效果呢？當(dāng)然有，但其他方法都是在一定程度上模擬真實(shí)病毒感染人體的過程。既然是模擬，就一定存在信息的失真。
新冠病毒中和抗體實(shí)驗(yàn)
此方法是用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法來模擬病毒感染細(xì)胞的過程。如果注射疫苗后產(chǎn)生了中和抗體，病毒感染細(xì)胞的過程就會(huì)被阻斷。此方法因?yàn)橛谢畈《敬嬖?，因此必須?strong style="box-sizing:border-box;">生物安全三級實(shí)驗(yàn)室中才能進(jìn)行。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程也耗時(shí)耗力，一般需要5-7天才能出結(jié)果。目前通常將此方法作為檢測中和抗體的金標(biāo)準(zhǔn)。各疫苗廠家在疫苗研發(fā)階段也主要采用此方法進(jìn)行檢測。
注意，此處是檢測中和抗體的金標(biāo)準(zhǔn)，并不是檢測疫苗效果的金標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)橐呙邕€涉及到細(xì)胞免疫效果，而此方法只能檢測體液免疫即產(chǎn)生抗體（含中和抗體）的效果。此外，由于新冠病毒變異株的存在，不同變異株可能有不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果（即疫苗可能不會(huì)對所有變異株有效）。
顧名思義，此處用到的是假病毒，即把新冠病毒的特異性序列（RBD、S蛋白等）克隆到其他致病性不高或者不致病的病毒上，然后用包裝好的假病毒來攻擊細(xì)胞。此方法的優(yōu)勢是不需要使用三級實(shí)驗(yàn)室，可以利用熒光或者酶來定量分析，比上述活病毒實(shí)驗(yàn)方便快捷一些。
? 抗體檢測?
這是各IVD廠家竭力探索的領(lǐng)域，各種方法學(xué)都有，名稱也都各異。檢測平臺(tái)包括快檢卡、生化和化學(xué)發(fā)光等等。常見的主要有以下幾種：
總抗體
接種疫苗后或者自然感染新冠病毒后，機(jī)體產(chǎn)生的針對新冠病毒的所有抗體，其中既包含了中和抗體，也包含了非中和抗體；既包含了IgG，也包含IgM和IgA等；既包含了針對S蛋白（或RBD）的抗體，也包含針對N蛋白或其它蛋白的抗體。但是目前，能針對以上所有抗體進(jìn)行檢測的試劑盒幾乎沒有。大部分檢測試劑盒只能檢測針對S蛋白或者N蛋白的抗體。因此會(huì)漏檢針對非S蛋白或者非N蛋白的抗體。
中和抗體
即檢測對新冠病毒有中和活性的抗體。中和抗體是一個(gè)功能性的概念，強(qiáng)調(diào)的是此類抗體的功能，即中和活性。金標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)然是第一條中提到的新冠病毒中和抗體實(shí)驗(yàn)。但是在快檢、生化和發(fā)光平臺(tái)上，也衍生出一些中和抗體的檢測方法。主要有：
1）針對RBD區(qū)域的抗體被視為中和抗體。新冠病毒感染人體細(xì)胞時(shí)，主要是病毒S蛋白上的RBD結(jié)構(gòu)域與人體細(xì)胞上的ACE2受體結(jié)合。因此有部分廠家近似的認(rèn)為，能與RBD區(qū)域結(jié)合的抗體就是中和抗體。但是，嚴(yán)格來講，RBD雖然是介導(dǎo)病毒感染的最關(guān)鍵區(qū)域，但并非所有針對RBD區(qū)域的抗體都一定是中和抗體。此外，也并非所有中和抗體都是針對RBD區(qū)域的。因此，這一方法的可靠性存在質(zhì)疑；
2）ACE2可以結(jié)合RBD，中和抗體也可以結(jié)合RBD，因此通過競爭法（即ACE2和中和抗體競爭結(jié)合RBD）也可以檢測到中和抗體。此種方法引入了競爭，在一定程度上模擬了抗體阻斷病毒（此處是病毒上的RBD結(jié)構(gòu)域）進(jìn)入細(xì)胞（此處是人體細(xì)胞上的ACE2受體）的過程，因此可以保證檢測出的抗體一定有中和活性，但是依然會(huì)漏檢針對非RBD區(qū)域的中和抗體。
無論哪種方法，檢測的中和抗體的結(jié)果可以是定量的，也可以是定性的。目前尚不明確何種滴度的中和抗體可以給人體足夠的保護(hù)，使人不會(huì)感染新冠病毒。
IgM或（和）IgG
目前市場上還有檢測新冠IgG或者IgM的試劑盒，此兩種試劑盒都能監(jiān)測機(jī)體在接種疫苗后的免疫狀態(tài)，IgM一般在接種后7-14天，IgG一般在一個(gè)月左右達(dá)到高峰。但是這兩種抗體與中和抗體之間沒有任何直接的關(guān)系（通常認(rèn)為中和抗體主要是IgG，但是中和抗體只占IgG的極少一部分，IgG的檢測結(jié)果高低不能反映中和抗體的高低），IgM和IgG的檢測結(jié)果不能用于評估疫苗是否有效。
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新冠病毒疫苗效果的體外檢測方法，主要是上述幾種。接種疫苗后，如果要檢測疫苗是否有效果，**當(dāng)然是作為金標(biāo)準(zhǔn)的新冠病毒中和抗體實(shí)驗(yàn)。但是，此種方法檢測通量低，難以大規(guī)模檢測。綜合可及性和成本的考慮，競爭法檢測中和抗體的結(jié)果在一定程度上可以表征疫苗接種后是否可以達(dá)到預(yù)期的效果。但是也要留意，即便是作為金標(biāo)準(zhǔn)的新冠病毒中和抗體實(shí)驗(yàn)，也忽略了人體免疫的半壁江山—細(xì)胞免疫，主要原因在于細(xì)胞免疫的效果相對更難以評估和量化。
結(jié)
論
疫苗是我們目前應(yīng)對新冠疫情最重要的武器。注射新冠疫苗后，可以通過競爭法檢測中和抗體的水平，在一定程度上表征疫苗是否能產(chǎn)生效果。中和抗體能維持多久、多高滴度的中和抗體才能產(chǎn)生保護(hù)效果等疑問還有待確定。但是無論有效與否，無論中和抗體能維持多久，疫苗的目的是減少被感染的幾率，為了“防患于未然”，日常還是需要加強(qiáng)戴口罩、勤洗手、保持社交距離等防疫措施。
END
文章來源：九強(qiáng)生物? |? 責(zé)編：Echo ?|? 校對：小九、小強(qiáng)